内部测试数据来啦，活细胞91%!不新鲜血液，如何分离到优质的PBMC细胞？山进生物

之前小编写过的微信不新鲜血液，如何分离到优质的PBMC细胞？给大家介绍了pluriSelect（德国）品牌的24h+ PBMC 24+ Spin Medium分离管和分离液产品，很多老师对这个产品很感兴趣。

因为Human PBMC（外周血单个核细胞）经常作为流式样本，或者是做下一步磁珠分选的样本。制备PBMC常用的方法就是密度梯度分离液，要求全血样本尽量新鲜，可是，由于种种原因，新鲜全血有时候拿不到，那分离效果可能不好。那我们这款产品就可以很好的解决这个问题。

可以从储存8-24小时的人外周血中分离PBMC的分离管：

货号	产品名称	厂家
44-19315-11	pluriMate II - 15ml centrifuge tube	pluriSelect

15ml分离管，预装了分离液，直接倒入2-7ml全血样本，离心即可，网状筛板介质可以防止细胞被红细胞污染，简单操作就可以得到PBMC了。

操作步骤：

Step 1 全血，分离液，离心机等处于室温条件

Step 2 预先离心分离管（1000g, 10s），筛板可以留3-5mm上清

Step 3 往分离管中直接加入血样，注意：不需要稀释血样，沿着管壁慢慢加血样，注意血样不要加太多，第一次用加3ml左右（15ml分离管）。

	15ml分离管	50ml分离管
加样本体积	2-7ml样本	5-30ml样本

Step 4 室温下，离心（800g，15min），注意：设置较慢的加速与减速（如果共有十档且第十档为最高档，加速与减速应该调整到第三档）。

Step 5 离心后，出现白膜层，白膜层在血浆下面，分离液上面。注意：用1ml移液枪或者巴氏吸管小心吸取白膜层。

Step 6 如果想得到干净的PBMC，我们可以加入wash buffer把PBMC洗2遍。(Cat#60-00080-10 ,10x Wash Buffer, pluriselect)

注意：如果没有买这个wash buffer, 可以收集白膜层到50ml离心管，加入20ml含10%胎牛血清的RPMI1640培养基来洗涤白膜层， 20°C，（300g，10min）离心，洗涤2遍。

Step 7 用0.9%(W/V)生理盐水或合适的培养基将淋巴细胞重悬备用。

小编的实验结果

小编这次在公司的实验室亲测了这款8-24h分离管-Cat#44-19315-11, pluriMate II - 15ml centrifugation tube, 100pcs, pre-filled PBMC 24+ Spin，实验证明，我们的分离管分离的PBMC，活率，以及流式结果都是棒棒哒。

对比测试

我们一个热心的客户也分享这款8-24h分离管-cat#44-19315-11, pluriMate II - 15ml centrifugation tube, 100 pcs, pre-filled PBMC 24+ Spin的使用结果。

实验样本：保存了5h的外周血的PBMC

分离外观：

活率统计：

来自热心的客户的分享

分离管

当然分离8 - 24小时PBMC的分离管不只15ml这个规格啦

如下图，预装分离液的分离管有2ml, 15ml, 50ml 3种规格，每种规格的分离管又有50根，100跟，500跟的包装。

货号	产品名称	规格	厂家
44-09302-10	pluriMate - 2 ml centrifuge tube	50 pcs	pluriSelect
44-09302-11		100 pcs
44-09302-15		500 pcs
44-19315-10	pluriMate II - 15ml centrifuge tube	50 pcs
44-19315-11		100 pcs
44-19315-15		500 pcs
44-19350-10	pluriMate II - 50ml centrifuge tube	50 pcs
44-19350-11		100 pcs
44-19350-15		500 pcs

分离液

如果您想直接用分离液，也可以选择Lympho 24+ Spin Medium / PBMC 24+ Spin Medium分离液，有100 ml，250ml，500ml三种规格分离液供您选择。

货号	产品名称	规格	厂家
60-00093-10	Lympho 24+ Spin Medium / PBMC 24+ Spin Medium	100ML	pluriSelect
60-00093-11		250ML
60-00093-12		500ML

其他的分离液

Pluriselect公司的分离液和分离管还有其他系列哦，汇总如下，每种分离液可以选择预装分离管（2ml,15ml,50ml规格），也可以选择整瓶分离液，有没有您想分离的细胞呢？

分离液类型	可分离的细胞
Leuko Spin Medium	所有白细胞（PBMC,PMNC,粒细胞）
Lympho Spin Medium / PBMC Spin Medium	单个核细胞（PBMC）
Lympho 24+ Spin Medium / PBMC 24+ Spin Medium	从8-24小时的外周血中分离PBMC
PLT Spin Medium	血小板（PLT）