密度梯度分离 > 即用型分离液
| 货号 | 规格 | 价格 | 货期 |
|---|---|---|---|
| 07801 | 250mL | 914 640 | 2周左右 |
| 07811 | 4x250mL | 2318 1623 | 3周左右 |
| 07851 | 500mL | 1458 802 | 2-3天 |
| 07861 | 6x500mL | 5160 3354 | 2-3天 |
详细说明
Lymphoprep 人淋巴细胞分离液(即用型)
Lymphoprep是利用密度梯度离心从人外周血、脐带血、以及骨髓中分离出单个核细胞(MNC:Mononuclear cells)(包括淋巴细胞lymphocytes和单核细胞monocytes)的无菌、内毒素含量低的即用型分离液，具有与cytiva/思拓凡（原GE Healthcare）公司的昂贵的Ficoll-Paque PLUS和Ficoll-Paque PREMIUM分离液同样的指标。Lymphoprep可以用于替换Ficoll-Paque PLUS或Ficoll-Paque PREMIUM，而操作过程无需任何改变。
对于大多数正常人和病人的样本，Lymphoprep都能够快速、简单、可靠地得到优异的分离效果。
参数
主要成分：泛影葡胺钠(Sodium diatrizoate)：9.1% (w/v)；多聚糖（polysacccharide）：5.7% (w/v)
密度：1.077±0.001g/ml
渗透性：290±15mOsm
内毒素含量：<1.0EU/ml
灭菌：已灭菌
分离所得单个核细胞中红细胞的含量：整个细胞数目的3-10%。
分离原理
单个核细胞(MNC)的密度低于粒细胞(Granulocytes)和红细胞(Erythrocytes)，利用密度在1.077g/ml而且近于等渗的Lymphoprep溶液作为屏障作密度梯度离心时，红细胞和粒细胞由于密度大，故穿过Lymphoprep沉于底部，而单个核细胞密度等于或稍低于Lymphoprep分离液，故位于分离液界面上，从而在血浆和Lymphoprep的界面上获得单个核细胞。Lymphoprep分离液含有多聚糖（polysacccharide）,多聚糖能增强红细胞的聚集，从而使红细胞更易于沉降。
使用方法
1、保证Lymphoprep分离液的温度在15度-25度。
2、去掉瓶盖，将瓶子颠倒几次，以保证瓶子内溶液均匀。
3、按下述方法用注射器或移液器吸出Lymphoprep分离液：
注射器
将瓶子倒过来至合适的角度，注射器针头扎过橡胶瓶盖，吸取所需体积的Lymphoprep分离液。
移液器
提起铝环并拉下金属密封圈，取下银环。
使用无菌技术，取出橡胶瓶塞，取出所需体积的Lymphoprep分离液。
使用无菌技术，重新塞入橡胶瓶塞。
4、将吸取到的Lymphoprep分离液加到离心管中（体积的选择参照下表）
血液(mL) | 稀释液 (mL) | Lymphoprep(mL) | 离心管(mL) |
1 | 1 | 1.5 | 5 |
2 | 2 | 3 | 14 |
3 | 3 | 3 | 14 |
4 | 4 | 4 | 14 |
5 | 5 | 10 | 50 |
10 | 10 | 15 | 50 |
15 | 15 | 15 | 50 |
5、按照上表将血液稀释。
6、小心地将稀释后的血液铺加到离心管里面的Lymphoprep分离液上面，注意尽量不要将血液和分离液的界面混了，要界面分层清晰。
7、在室温下（20摄氏度左右），用水平转子离心机，关闭制动器的情况下，800g的离心力，离心20分钟。（如果血液存放时间超过2小时——从人体抽出算起，离心时间延长为30分钟）。
8、用移液管直接吸取血浆和Lymphoprep分离液界面处的淋巴细胞层，注意，不要去除上面的血液层，而是直接吸取。移至另一离心管中。
9、加入稀释液，离心，得到的沉淀即为单个核细胞，即可用于后续的实验。
注意事项：
该分离液用于人（也有客户反馈可以用于大鼠）。