密度梯度分离 > 即用型分离液

人  淋巴细胞  骨髓  脐带血  外周血  

人淋巴细胞分离液

品牌:达优

储存:常温密封避光保存,保质期2年

货号规格价格货期
7111011100mL160  120现货
7111012250mL300  225现货

详细说明

【产品介绍】

人淋巴细胞分离液为即用型,含有聚蔗糖,它能加速红细胞皱缩沉淀,有助于提高 淋巴细胞的分离效果。该产品无菌包装,通过内毒素检测。分离获得的细胞经洗涤后能 用于体外培养,不影响后续实验操作。

本品主要用于分离人外周血淋巴细胞,也适用于大多数哺乳动物单个核细胞的分离。

【包装规格】

货号产品名称规格
7111011Human Lymphocyte Separation Medium人淋巴细胞分离液100mL
7111012250mL

【产品信息】

适用范围用于分离人外周血淋巴细胞,也适用于大多数哺乳动物单个核细胞的分离。
内毒素含量< 0.5EU/mL
分离液密度(1.077±0.001) g/mL (20℃)
渗透压(290±15) mOsmol/kg
保存条件常温密封避光保存,保质期2年。

【原理介绍】

密度梯度沉降法是根据细胞密度差异,借助细胞分离液和离心,进行细胞分离纯化 的常用方法之一。细胞分离液产生一定程度的密度梯度,将稀释后的全血平铺于分离液 之上,离心后,红细胞、粒细胞比重大,沉于管底;淋巴细胞和单核细胞的比重小于或 等于分离液比重,漂浮于分离液的液面上,也可有少部分细胞悬浮在分离液中。吸取分 离液液面的细胞,就可从外周血中分离到单个核细胞。

【使用方法】

1.   鲜抗EDTA橼酸素抗剂均可用等体积等渗溶液(PBS 或生理盐水)稀释全血。

2. 在离心管中加入一定体积的分离液,将稀释后的血样平铺到分离液液面上方,保持 两液面界面清晰。分离液、抗凝未经稀释全血、等渗溶液(PBS 或生理盐水)体积 为 1:1:1

3.   700g-800g 20min-30min设置较慢的升降速(如果共有十档且 第十档为最高档,升降速应该调整到第三档)。

 4.   结束是红层是离液层是/匀浆与分离液层之间是一层薄较致密的白膜,即:单个核细胞(包括淋巴细胞和单核细 胞)层。小心吸取白膜层到另一离心管中。

5.   渗溶PBS理盐或培基)释到定体,颠混匀室温,水平 转子 250g,离心 10min 弃上清。复洗1-2

6.   渗溶PBS理盐或培基)细胞悬备

【注意事项】

1.   细胞离液于实前放至恢室温打开盖前颠倒

2.   抗凝血所等渗PBS 理盐)均无菌体,RPMI 1640基稀

3.   1:1 血液降低细胞凝聚提高巴细收获

4.   为保持淋巴细胞的活性,应该采血后尽快进行分离。分离细胞层实际上是单个核细 胞层,包括淋巴细胞和单核细胞。

5. 健康人新鲜外周血,推荐分离条件是 800g20 分钟;如果外周血采集后放置时间过 长,可能会造成分离效果变差红细胞残留增多,可以适当延长离心时间改善分离效 果。

6.   若操作无误但离心后的界面之间不能形成单个核细胞层,可能是血液量不足,或未 使用新鲜血液,或者不适于分离该种动物血液。

7.   液开后,尽量2℃-8℃,避因液挥发成分液密变化, 影响分离效果。

【参考文献】

  1. Boyum A.. Scand J. Clin. Lab. Invest. 1968; 21, Suppl. 97.
  2. Harris R. & Ukayiofo EV. Lancet. 1969; 327: 7615.

版本号:C/2