人  中性粒细胞  外周血  

Lympholyte-poly多型核粒细胞分离液

品牌：CEDARLANE

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储存：避光、室温保存。

简述：

Lympholyte-Poly多型核粒细胞分离液是专门用于从人血液中分离多型核粒细胞/中性粒细胞的密度梯度分离液。

参数：

成分：Dextran 500和Sodium Metrizoate

密度：1.113±0.001g/cm³

渗透压：445 ± 15 mOsm

储存条件：

避光、室温保存。

操作步骤：

1.在离心管中小心地加入5 mL Lympholyte^®-poly；

2.使用移液管，小心地将5 mL的全血铺在Lympholyte^®-poly上，在界面上尽可能少地混合（图A）；

3.由于Lympholyte^®-poly的密度比细胞悬液更大，因此将形成一个明显的界面（图B）。

4.在室温下，450-500g离心30-35分钟（较长时间的离心或较大的离心力将导致多形核细胞进一步向底部红细胞群沉积）；

5.离心后，红细胞聚集，将出现两条白细胞带（图C）。上层带为单核细胞，下层带为多形核细胞（约5-10mm）；

6.用移液管吸取多形核细胞条带，用等体积的等渗溶液重悬细胞，以恢复细胞正常渗透压。；

7.用2倍体积的生理盐水或培养基进一步稀释，400g离心10min，清洗细胞；

8.去除上清液，将细胞重悬至合适的缓冲液中，进行下一步实验。